浆细胞性乳腺炎模型小鼠调节性B细胞分化情况

doi:10.3877/cma.j.issn.1674-0807.2025.05.003

中华乳腺病杂志(电子版) ›› 2025, Vol. 19 ›› Issue (05) : 275 -281. doi: 10.3877/cma.j.issn.1674-0807.2025.05.003

论著

浆细胞性乳腺炎模型小鼠调节性B细胞分化情况

潘驰¹, 姜伟², 孔弘扬³, 倪清涛⁴^,^†(

)

¹　225300　南京医科大学泰州临床医学院/南京医科大学附属泰州人民医院普外科
²　225300　南京医科大学泰州临床医学院/南京医科大学附属泰州人民医院泌尿外科
³　225300　南京医科大学泰州临床医学院/南京医科大学附属泰州人民医院骨科
⁴　225300　南京医科大学泰州临床医学院/南京医科大学附属泰州人民医院肿瘤科

收稿日期:2024-10-21 出版日期:2025-10-01
通信作者: 倪清涛
基金资助:
国家自然科学基金青年科学基金项目(82505131); 南京医科大学泰州临床医学院科研项目-国自然（青年基金）培育专项(TZKY20220105)

Differentiation of regulatory B cells in a mouse model of plasma cell mastitis

Chi Pan¹, Wei Jiang², Hongyang Kong³, Qingtao Ni⁴^,^†()

¹ Department of General Surgery，Affiliated Taizhou People's Hospital of Nanjing Medical University/Taizhou School of Clinical Medicine，Nanjing Medical University，Taizhou 225300，China
² Department of Urology，Affiliated Taizhou People's Hospital of Nanjing Medical University/Taizhou School of Clinical Medicine，Nanjing Medical University，Taizhou 225300，China
³ Department of Orthopedics，Affiliated Taizhou People's Hospital of Nanjing Medical University/Taizhou School of Clinical Medicine，Nanjing Medical University，Taizhou 225300，China
⁴ Department of Oncology，Affiliated Taizhou People's Hospital of Nanjing Medical University/Taizhou School of Clinical Medicine，Nanjing Medical University，Taizhou 225300，China

Received:2024-10-21 Published:2025-10-01
Corresponding author: Qingtao Ni

全文 ( ) 下载PDF ( ) 导出引用

引用本文：

潘驰, 姜伟, 孔弘扬, 倪清涛. 浆细胞性乳腺炎模型小鼠调节性B细胞分化情况[J/OL]. 中华乳腺病杂志(电子版), 2025, 19(05): 275-281.

Chi Pan, Wei Jiang, Hongyang Kong, Qingtao Ni. Differentiation of regulatory B cells in a mouse model of plasma cell mastitis[J/OL]. Chinese Journal of Breast Disease(Electronic Edition), 2025, 19(05): 275-281.

目的

探讨浆细胞性乳腺炎（PCM）模型小鼠调节性B细胞（Breg）分化情况。

方法

15只雌性BALB/c小鼠按随机数字表法分为3组，PCM模型组：乳腺内注射80 μl含PCM患者病变组织匀浆液的油包水乳剂；弗氏佐剂组：乳腺内注射等体积完全弗氏佐剂；对照组：乳腺内注射等体积生理盐水。HE染色观察小鼠乳腺组织病理学表现，酶联免疫吸附实验（ELISA）检测小鼠血清中炎症因子的表达。采用流式细胞术检测小鼠脾脏中Breg比例，免疫荧光检测小鼠乳腺组织中CD21及CD138的表达。计量资料多组间比较采用方差分析，两两比较采用LSD法。

结果

HE染色结果显示PCM模型组小鼠乳腺组织浆细胞浸润，ELISA结果显示PCM模型组小鼠炎症因子IL-10、TNF-α、IL-6、IL-35和IL-1β的表达较对照组和弗氏佐剂组明显升高（P均<0.001）。流式细胞术检测结果显示PCM模型组CD19⁺CD5^-CD1d⁺IL10⁺Breg比例较对照组和弗氏佐剂组显著升高（24.66%比3.09%，P<0.001；24.66%比2.53%，P<0.001），CD19⁺CD5⁺CD1d⁺IL10⁺Breg比例也较对照组和弗氏佐剂组明显升高（11.66%比2.92%，P<0.001；11.66%比1.93%，P<0.001）。免疫荧光检测结果显示PCM模型组小鼠乳腺组织中CD21阳性细胞比例较对照组和弗氏佐剂组显著增加（36.45%比16.77%，P<0.001；36.45%比16.47%，P<0.001），CD138阳性细胞比例也较对照组和弗氏佐剂组明显增加（17.18% 比7.33%，P<0.001；17.18%比7.48%，P<0.001）。

结论

PCM模型小鼠Breg分化异常。

关键词: 浆细胞性乳腺炎, 炎症因子, 免疫细胞, 调节性B细胞

Objective

To investigate the regulatory B cell (Breg) differentiation in a mouse model of plasma cell mastitis （PCM）.

Methods

Fifteen female BALB/c mice were randomly divided into three groups： PCM model group receiving 80 μl intramammary injection of oil in water emulsion containing pathological tissue homogenate from one PCM patient，Freund's adjuvant group receiving complete Freund's adjuvant injection of the same amount into the breast and control group receiving physiological saline injection of the same amount into the breast. HE staining was used to observe the pathological manifestations of mouse breast tissue. Enzyme linked immunosorbent assay （ELISA） was used to detect the expression of inflammatory factors in mouse serum，flow cytometry was used to detect the proportion of Breg in spleen，and immunofluorescence was used to detect the expression of CD21 and CD138 in mouse breast tissue. Continuous data were compared among multiple groups using analysis of variance，and pairwise comparisons were conducted using the LSD test.

Results

The HE staining results showed plasma cell infiltration in the breast tissue of mice in the PCM model group. The ELISA results showed that the expressions of inflammatory factors IL-10，TNF-α，IL-6，IL-35 and IL-1β in the PCM model group mice were significantly higher than those in the control group and Freund's adjuvant group （all P<0.001）. The flow cytometry results showed that the proportion of CD19⁺CD5^-CD1d⁺IL10⁺ Breg in the PCM model group was significantly higher than that in the control group and Freund's adjuvant group （24.66% vs 3.09%，P<0.001； 24.66% vs 2.53%，P<0.001），and the proportion of CD19⁺CD5⁺CD1d⁺IL10⁺ Breg was significantly increased compared with the control group and Freund's adjuvant group （11.66% vs 2.92%，P<0.001； 11.66% vs 1.93%，P<0.001）. The proportion of CD21 positive cells in the breast tissue of mice in the PCM model group was significantly increased compared with the control group and Freund's adjuvant group （36.45% vs 16.77%，P<0.001； 36.45% vs 16.47%，P<0.001），and the proportion of CD138 positive cells was significantly increased compared with the control group and Freund's adjuvant group （17.18% vs 7.33%，P<0.001； 17.18% vs 7.48%，P<0.001）.

Conclusion

The PCM mouse model shows abnormal differentiation of Breg.

Key words: Plasma cell mastitis, Inflammatory factors, Immune cells, Regulatory B cells

图1 各组小鼠乳腺组织病理学表现（HE ×200）　　a图为对照组乳腺组织，未见明显浆细胞浸润；b图为弗氏佐剂组乳腺组织，可见少量炎症细胞浸润；c图为PCM模型组乳腺组织，可见大量浆细胞浸润注：PCM为浆细胞性乳腺炎

表1 各组小鼠血清中炎症因子的表达（pg/ml，

x ¯

±s）

组别	只数	IL-10	TNF-α	IL-4	IL-6	IL-35	IL-1β
对照组	5	286.40±34.77	259.46±61.95	82.44±24.14	82.03±15.73	16.42±6.55	64.67±13.55
弗氏佐剂组	5	280.41±42.38	268.55±115.39	86.91±17.81	80.62±14.52	17.31±6.33	68.95±25.95
PCM模型组	5	603.01±37.94^ab	856.10±110.89^ab	97.45±23.17	201.86±17.36^ab	38.88±7.93^ab	219.83±26.69^ab
F值		114.945	59.534	0.620	95.598	16.647	74.656
P值		<0.001	<0.001	0.554	<0.001	<0.001	<0.001

表1 各组小鼠血清中炎症因子的表达（pg/ml，

x ¯

±s）

组别	只数	IL-10	TNF-α	IL-4	IL-6	IL-35	IL-1β
对照组	5	286.40±34.77	259.46±61.95	82.44±24.14	82.03±15.73	16.42±6.55	64.67±13.55
弗氏佐剂组	5	280.41±42.38	268.55±115.39	86.91±17.81	80.62±14.52	17.31±6.33	68.95±25.95
PCM模型组	5	603.01±37.94^ab	856.10±110.89^ab	97.45±23.17	201.86±17.36^ab	38.88±7.93^ab	219.83±26.69^ab
F值		114.945	59.534	0.620	95.598	16.647	74.656
P值		<0.001	<0.001	0.554	<0.001	<0.001	<0.001

表2 各组小鼠脾脏中CD19⁺CD5^-CD1d⁺IL10⁺以及CD19⁺CD5⁺CD1d⁺IL10⁺ Breg比例（

x ¯

±s，%）

组别	只数	CD19⁺CD5^-CD1⁺IL10⁺	CD19⁺CD5⁺CD1⁺IL10⁺
对照组	5	3.09±0.55	2.92±1.57
弗氏佐剂组	5	2.53±1.16	1.93±1.24
PCM模型组	5	24.66±3.15^ab	11.66±2.32^ab
F值		124.213	27.382
P值		<0.001	<0.001

表2 各组小鼠脾脏中CD19⁺CD5^-CD1d⁺IL10⁺以及CD19⁺CD5⁺CD1d⁺IL10⁺ Breg比例（

x ¯

±s，%）

组别	只数	CD19⁺CD5^-CD1⁺IL10⁺	CD19⁺CD5⁺CD1⁺IL10⁺
对照组	5	3.09±0.55	2.92±1.57
弗氏佐剂组	5	2.53±1.16	1.93±1.24
PCM模型组	5	24.66±3.15^ab	11.66±2.32^ab
F值		124.213	27.382
P值		<0.001	<0.001

图2 流式细胞术检测各组小鼠CD19⁺CD5^-CD1d⁺IL10⁺和CD19⁺CD5⁺CD1d⁺IL10⁺Breg比例　　a~c图分别为对照组、弗氏佐剂组和PCM模型组CD19⁺CD5^-CD1d⁺IL10⁺Breg比例；d~f图分别为对照组、弗氏佐剂组和PCM模型组CD19⁺CD5⁺CD1d⁺IL10⁺Breg比例注：R5为CD19⁺CD5^-CD1d⁺IL10⁺；R6为CD19⁺CD5⁺CD1d⁺IL10⁺；BL为光学检测通道；H为信号强度高的细胞群体；IL为白细胞介素；FITC为异硫氰酸荧光素；CD为白细胞分化抗原；PE为藻红蛋白；Breg为调节性B细胞

表3 各组小鼠乳腺组织中CD21及CD138阳性细胞比例（

x ¯

±s，%）

组别	只数	CD21	CD138
对照组	5	16.77±4.19	7.33±3.19
弗氏佐剂组	5	16.47±4.46	7.48±2.02
PCM模型组	5	36.45±7.54^ab	17.18±2.44^ab
F值		20.884	5.951
P值		<0.001	0.016

表3 各组小鼠乳腺组织中CD21及CD138阳性细胞比例（

x ¯

±s，%）

组别	只数	CD21	CD138
对照组	5	16.77±4.19	7.33±3.19
弗氏佐剂组	5	16.47±4.46	7.48±2.02
PCM模型组	5	36.45±7.54^ab	17.18±2.44^ab
F值		20.884	5.951
P值		<0.001	0.016

图3 免疫荧光观测各组小鼠乳腺组织中CD21的表达（×200）　　a图为对照组CD21表达；b图为对照组DAPI染色；c图为a图和b图融合图像；d图为弗氏佐剂组CD21表达；e图为弗氏佐剂组DAPI染色；f图为d图和e图融合图像；g图为PCM模型组CD21表达；h图为PCM模型组DAPI染色；i图为g图和h图融合图像注：CD为白细胞分化抗原；DAPI为二脒基苯基吲哚；PCM为浆细胞性乳腺炎

图4 免疫荧光观测各组小鼠乳腺组织中CD138的表达（×200）　　a图为对照组CD138表达；b图为对照组DAPI染色；c图为a图和b图融合图像；d图为弗氏佐剂组CD138表达；e图为弗氏佐剂组DAPI染色；f图为d图和e图融合图像；g图为PCM模型组CD138表达；h图为PCM模型组DAPI染色；i图为g图和h图融合图像注：CD为白细胞分化抗原；DAPI为二脒基苯基吲哚；PCM为浆细胞性乳腺炎

［1］	Zhu YC， Zhang Y， Deng SH， et al. Evaluation of plasma cell mastitis with superb microvascular imaging ［J］. Clin Hemorheol Microcirc， 2019， 72（2）： 129-138.
［2］	Xing M， Zhang S， Zha X， et al. Current understanding and management of plasma cell mastitis： can we benefit from what we know？［J］. Breast Care （Basel），2022，17（3）：321-329.
［3］	潘伍亮，张姜宇，许春燕，等. 基于网络药理学和分子对接研究丹参治疗浆细胞性乳腺炎的作用机制［J］. 山东科学，2022，35（6）：33-41.
［4］	付豹，王进峰，刘晓飞，等. 万应膏外敷联合手术治疗浆细胞性乳腺炎30例疗效观察［J］. 安徽医药，2021， 25（1）： 64-67.
［5］	李婷. 中西医结合治疗急性期浆细胞性乳腺炎疗效观察［J］. 实用中医药杂志，2019， 35（6）： 710-712.
［6］	Liu L，Zhou F，Wang P，et al. Periductal mastitis： an inflammatory disease related to bacterial infection and consequent immune responses？［J］. Mediators Inflamm， 2017， 2017： 5309081.
［7］	朱强，王丕琳. 浆细胞性乳腺炎患者超声弹性应变率值与血清E₂、PRL、Ki-67指标表达相关性及在预后评估的应用价值［J］. 生物医学工程与临床，2020， 24（3）： 272-277.
［8］	Ni Q， Han G， Pan C. Single-cell transcriptomics reveals an abnormal immune microenvironment in plasma cell mastitis ［J］. Ann Med， 2025， 57（1）： 2446694.
［9］	Bao J，Betzler AC，Hess J，et al. Exploring the dual role of B cells in solid tumors：implications for head and neck squamous cell carcinoma ［J］. Front Immunol， 2023， 14： 1233085.
［10］	马晓莉，李莉娟，雷茜，等. 调节性B细胞在血液系统恶性肿瘤中的研究进展［J］. 医学研究杂志，2024， 53（5）： 12-16， 26.
［11］	Mauri C. Novel frontiers in regulatory B cells ［J］. Immunol Rev， 2021， 299（1）： 5-9.
［12］	Dasgupta S， Dasgupta S， Bandyopadhyay M. Regulatory B cells in infection， inflammation， and autoimmunity ［J］. Cell Immunol， 2020， 352：104076.
［13］	Berthelot JM， Jamin C， Amrouche K， et al. Regulatory B cells play a key role in immune system balance ［J］. Joint Bone Spine， 2013， 80（1）： 18-22.
［14］	Tan AH， Chong WP， Ng SW， et al. Aberrant presentation of self-lipids by autoimmune B cells depletes peripheral iNKT cells ［J］. Cell Rep， 2014， 9（1）： 24-31.
［15］	Wang L， Qiu J， Yu L， et al. Increased numbers of CD5⁺CD19⁺CD1d^highIL-10⁺ Bregs， CD4⁺Foxp3⁺ Tregs， CD4⁺CXCR5⁺Foxp3⁺ follicular regulatory T （TFR） cells in CHB or CHC patients ［J］. J Transl Med， 2014， 12： 251.
［16］	Yanaba K， Bouaziz JD， Haas KM， et al. A regulatory B cell subset with a unique CD1dhiCD5⁺ phenotype controls T cell-dependent inflammatory responses ［J］. Immunity， 2008， 28（5）： 639-650.
［17］	Faccin M，Caillot O，Levêque J，et al. Plasma cell mastitis in women with rheumatoid arthritis treated with TNFα antagonists： report of 2 cases ［J］. Joint Bone Spine， 2016， 83（5）： 593-594.
［18］	崔振，余建军，张大庆，等. 浆细胞性乳腺炎小鼠模型的建立［J］. 中华全科医学，2013， 11（12）： 1831-1832.
［19］	Liu Y，Zhang J，Zhou YH，et al. Activation of the IL-6/JAK2/STAT3 pathway induces plasma cell mastitis in mice ［J］. Cytokine， 2018， 110： 150-158.
［20］	Guo J，Gu M，Zhang W，et al. Aberrant IL-35 levels in patients with primary Sjogren's syndrome ［J］. Scand J Immunol， 2018， 88（5）： e12718.
［21］	李鑫，王永福. 原发性干燥综合征患者血中Breg、Tfh及Tfr细胞的表达及意义［J］. 包头医学院学报，2023， 39（10）： 58-63.
［22］	Wan M，Ma Z，Han J，et al. 5-HT induces regulatory B cells in fighting against inflammation-driven ulcerative colitis ［J］. Int Immunopharmacol， 2023， 125（Pt A）： 111042.
［23］	Crickx E，Mahevas M. B-cell responses to ITP treatments ［J］. Br J Haematol， 2024， 204（2）： 397-398.
［24］	Daamen AR，Alajoleen RM，Grammer AC，et al. Single-cell RNA sequencing analysis reveals the heterogeneity of IL-10 producing regulatory B cells in lupus-prone mice ［J］. Front Immunol， 2023， 14： 1282770.
［25］	Catalan D，Mansilla MA，Ferrier A，et al. Immunosuppressive mechanisms of regulatory B cells ［J］. Front Immunol， 2021， 12： 611795.
［26］	Ochoa-Repáraz J， Mielcarz DW， Haque-Begum S， et al. Induction of a regulatory B cell population in experimental allergic encephalomyelitis by alteration of the gut commensal microflora ［J］. Gut Microbes， 2010， 1（2）： 103-108.
［27］	Zhu H， Xu J， Wang W， et al. Intratumoral CD38⁺CD19⁺B cells associate with poor clinical outcomes and immunosuppression in patients with pancreatic ductal adenocarcinoma ［J］. EBioMedicine， 2024， 103： 105098.
［28］	Keller B， Strohmeier V， Harder I， et al. The expansion of human T-bet^highCD21^low B cells is T cell dependent ［J］. Sci Immunol， 2021， 6（64）： eabh0891.

[1]	高娟, 徐建庆, 闫芳, 丁盛华, 刘霞. Rutkow、TAPP、TEP 手术治疗单侧腹股沟疝患者的临床疗效及对血清炎症因子水平的影响[J/OL]. 中华疝和腹壁外科杂志(电子版), 2024, 18(06): 675-680.
[2]	邢嘉翌, 龚佳晟, 祝佳佳, 陆群. 肺癌化疗患者继发肺部感染的病原菌耐药性及炎症因子变化分析[J/OL]. 中华肺部疾病杂志(电子版), 2024, 17(05): 714-718.
[3]	刘猛, 郑汉文, 任飞, 王宇宇, 张荣, 高彩云, 宋飞龙, 高惠, 顾建文, 聂闯. 微重力环境下中性粒细胞胞外诱捕网在大鼠视网膜炎症改变中的作用[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2025, 15(02): 75-81.
[4]	唐敏英, 邬绿莹, 陈津, 路君, 吴仲秋. 肾移植术后BKV 肾病免疫细胞浸润及关键基因分析[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2025, 15(01): 12-19.
[5]	王大伟, 陆雅斐, 皇甫少华, 陈玉婷, 陈澳, 江滨. 间充质干细胞通过调控免疫机制促进创面愈合的研究进展[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2024, 14(06): 361-366.
[6]	方兴保, 庞国莲, 李月宏, 蔡艳. 基于多组学分析MCAM在肝癌中表达及其与生存预后和免疫细胞浸润的关系[J/OL]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2025, 14(05): 716-724.
[7]	陈月阳, 王景景, 王淑莹, 杨以太, 李泽萌, 胡迪, 周蓬勃, 李伟, 任党利, 孙洪涛. 五苓散对缺氧大鼠高原脑水肿的改善作用及机制研究[J/OL]. 中华神经创伤外科电子杂志, 2025, 11(02): 86-93.
[8]	张衡, 施歌, 张泽, 高振轩, 杨文强, 王琦, 张黎. 血浆5-HT相关基因表达与免疫细胞丰度在糖尿病周围神经病中的作用研究[J/OL]. 中华脑科疾病与康复杂志(电子版), 2025, 15(02): 72-80.
[9]	刘麒, 陈萍, 曹筱璇, 周梅, 张斌强, 朱文博. 幽门螺杆菌感染对帕金森病患者疾病进展及外周炎症因子、凝血功能指标特征的相关性研究[J/OL]. 中华消化病与影像杂志(电子版), 2025, 15(03): 262-266.
[10]	谷肖明, 沈敏, 王瑀, 边燕. 肝癌术后感染患者肠道菌群特征与机体炎症、免疫功能及肠道功能的相关性研究[J/OL]. 中华消化病与影像杂志(电子版), 2025, 15(03): 224-228.
[11]	杜宝静, 李敏叶, 王云霞, 申永静, 谈威威. 轮状病毒感染相关腹泻患儿肠道菌群特征与血清锌、肌酸激酶同工酶及炎症因子的关系[J/OL]. 中华消化病与影像杂志(电子版), 2025, 15(01): 78-82.
[12]	李晓达, 焦岗军, 李天牧, 姜炬芳. 头孢地尼分散片联合微创旋切术对浆细胞性乳腺炎的治疗效果及安全性评估[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2025, 19(01): 14-19.
[13]	龚何燕, 戴俊, 杨惠明, 李硕, 徐敏, 宋红毛, 怀德. VEGF、IL-6 在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征诊断及手术治疗中的价值[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2024, 18(11): 1000-1006.
[14]	李忠鑫, 陈雪英, 甘立军. 汉黄芩素抗炎活性的研究进展[J/OL]. 中华诊断学电子杂志, 2025, 13(01): 20-25.
[15]	门航, 厉周, 韩帅. 肥胖与2 型糖尿病研究进展[J/OL]. 中华肥胖与代谢病电子杂志, 2025, 11(01): 62-69.

阅读次数

全文

摘要

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

Differentiation of regulatory B cells in a mouse model of plasma cell mastitis

模态框（Modal）标题

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

Differentiation of regulatory B cells in a mouse model of plasma cell mastitis