线粒体DNA缺失对人乳腺癌MDA-MB-231细胞药物敏感性的影响

doi:10.3877/cma.j.issn.1674-0807.2008.04.007

目的

探讨线粒体DNA缺失对人乳腺癌细胞药物敏感性的影响。

方法

采用溴化乙锭（EB）处理获得人乳腺癌细胞MDA-MB-231的线粒体DNA缺失（rho⁰ MDA-MB-231）细胞，电镜下观察细胞形态改变，胶原凝胶包埋三维立体培养法（CDDST）对比分析细胞的药物敏感性，免疫组织化学方法检测P-糖蛋白（P-gp）、乳腺癌耐药蛋白（BCRP）的表达。

结果

与MDA-MB-231细胞比较，rho^o MDA-MB-231细胞线粒体数量增多，嵴消失呈空泡样改变，对化疗药物相对抵抗，P-gp、BCRP的表达明显增加。

结论

线粒体的损伤可能参与了乳腺癌细胞耐药表型的形成。

关键词: 线粒体, 线粒体DNA, 乳腺癌, 多药耐药

Objective

To explore the relationship between mitochondrial DNA deletion and drug resistance in human breast cancer cells.

Methods

The rho⁰-derivative of MDA-MB-231 was generated by treating the cultured cells with ethidium bromide.The morphologies were confirmed by transmission electron microscope（TEM）.The sensitivities to chemotherapy were determined by Collagen Gel Droplet Embedded Culture-Drug Sensitivity Test（CD-DST）.P-glycoprotein（P-gp）and breast cancer resistance protein（BCRP） expression were detected by immunohistochemistry.All the differences were comparatively analyzed between MDA-MB-231 and rho⁰ MDA-MB-231 cells.

Results

Compared with MDA-MB-231 cells，rho⁰ MDAMB-231 cells showed different characters，including more mitochondria and cristae vacuolation，less drug sensitivity，and markedly higher expression of P-gp and BCRP.

Conclusions

Mitochondrial DNA deletion may play a role in the formation of drug resistance phenotype of human breast cancer.

Key words: Mitochondria, Mitochondrial DNA, Breast neoplasms, Multidrug resistance

表1 药物处理浓度表

药物	浓度1/(μg·ml^-1)	浓度2/(μg·ml^-1)
顺铂	0.2	2.0
吉西他滨	0.03	0.30
紫杉醇	1	10
氟尿嘧啶	1	10
吡柔比星	1	10

表1 药物处理浓度表

药物	浓度1/(μg·ml^-1)	浓度2/(μg·ml^-1)
顺铂	0.2	2.0
吉西他滨	0.03	0.30
紫杉醇	1	10
氟尿嘧啶	1	10
吡柔比星	1	10

图1 MDA-MB-231细胞（电镜×10 000）

图2 rho⁰MDA-MB-231细胞（电镜×10 000）

图3 药物处理后细胞的相对生存率 PTX1：PTX 1μg/ml；PTX10：PTX 10μg/ml；THP1：THP 1μg/ml；THP10：THP 10μg/ml；GEM0.03：GEM 0.03μg/ml；GEM0.3：GEM 0.3μg/ml；DDP0.2：DDP 0.2μg/ml；DDP2：DDP2μg/ml；5-FU1：5-FU 1μg/ml；5-FU10：5-FU 10μg/ml

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Effect of mitochondrial DNA deletion on the sensitivity of MDA-MB-231 cells to chemotherapeutic drugs

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